研究發(fā)現(xiàn)，外泌體參與調(diào)控重要的細(xì)胞生理活動(dòng)，如免疫應(yīng)答、凋亡、血管生成、炎癥反應(yīng)等，其有望用于開發(fā)疾病治療的潛在靶點(diǎn)、早期診斷標(biāo)記物、靶向藥物載體等，已成為近年來生命科學(xué)及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重要研究熱點(diǎn)。

外泌體研究策略

注： miRNA、piRNA、lncRNA、mRNA等功能驗(yàn)證方案及涉及產(chǎn)品請(qǐng)咨詢銳博生物技術(shù)人員

01. 外泌體抽提【自主專利+客戶文章1600+篇】

外泌體功能研究的關(guān)鍵前提是提取出高質(zhì)量的外泌體，傳統(tǒng)提取方法利用超速離心或密度梯度離心對(duì)外泌體進(jìn)行富集，這些方法耗時(shí)耗力，提取效果或產(chǎn)量卻并不理想。

銳博生物擁有自主專利的新型外泌體提取試劑盒，僅需通過簡(jiǎn)單混勻和常規(guī)離心，即可從樣本中獲取大量結(jié)構(gòu)完整的外泌體，為您提供更便捷、高效、高純度的提取方法。

【一種分離外泌體的方法及其試劑盒?? 專利申請(qǐng)?zhí)枺篊A201510469340.3】

產(chǎn)品特點(diǎn)：

■ 操作簡(jiǎn)單，1小時(shí)快速抽提

■ 廣泛兼容多種樣品：培養(yǎng)上清、血清/血漿、尿液、腦脊液、唾液、乳汁、肺泡灌洗液等

■ 樣本少（血清2~4ml，培養(yǎng)上清20ml），提取量高

■ 富集效果精準(zhǔn)可靠

HeLa 細(xì)胞上清經(jīng)Ribo?Exosome Isolation Reagent 抽提，用攜帶熒光基團(tuán)的CD63 和CD81 抗體分別與抽提前樣本及抽提產(chǎn)物進(jìn)行免疫反應(yīng)，使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光強(qiáng)度。結(jié)果表明，抽提前兩個(gè)標(biāo)志物抗體熒光強(qiáng)度均處于背景閾值范圍內(nèi)，抽提后熒光強(qiáng)度明顯提升，呈現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，表明exosomes 被富集出來。

代表性客戶文章：

[1] Sun L, Zhu W, Zhao P, et al. Long noncoding RNA UCA1 from hypoxia-conditioned hMSC-derived exosomes: a novel molecular target for cardioprotection through miR-873-5p/XIAP axis[J]. Cell death & disease, 2020, 11(8): 1-16.

[2] Zhang K, Dong C, Chen M, et al. Extracellular vesicle-mediated delivery of miR-101 inhibits lung metastasis in osteosarcoma[J]. Theranostics, 2020, 10(1): 411.

[3] Bai M, Li J, Yang H, et al. MiR-135b delivered by gastric tumor exosomes inhibits FOXO1 expression in endothelial cells and promotes angiogenesis[J]. Molecular Therapy, 2019.

[4] Xu W, Wu Y, Hu Z, et al. Exosomes from Microglia Attenuate Photoreceptor Injury and Neovascularization in an Animal Model of Retinopathy of Prematurity[J]. Molecular Therapy-Nucleic Acids, 2019, 16: 778-790.

[5] Nie X, Fan J, Li H, et al. miR-217 promotes cardiac hypertrophy and dysfunction by targeting PTEN[J]. Molecular Therapy-Nucleic Acids, 2018, 12: 254-266.

產(chǎn)品訂購(gòu)：

02. 外泌體鑒定服務(wù)

a. 粒徑檢測(cè)

Zetasizer 儀器根據(jù)Stokes-Einstein 原理，使用動(dòng)態(tài)光散射檢測(cè)由于顆粒布朗運(yùn)動(dòng)而產(chǎn)生散射光的波動(dòng)隨時(shí)間的變化。檢測(cè)器將散射光信號(hào)轉(zhuǎn)化為電流信號(hào)，再通過數(shù)字相關(guān)器的運(yùn)算處理，得到顆粒在溶液中擴(kuò)散的速度信息，即擴(kuò)散系數(shù)。

H460細(xì)胞上清經(jīng)Ribo Exosomes Isolation Reagent抽提，Zetasizer Nano ZS 納米粒度儀檢測(cè)粒徑分布。

（注：實(shí)際檢測(cè)結(jié)果受不同樣本來源、樣本的純度等因素的影響，圖片僅供參考）

b. 表面標(biāo)記物檢測(cè)

Exosomes 常見的特異性標(biāo)記蛋白為CD63 和CD81，使用熒光的直標(biāo)抗體結(jié)合流式細(xì)胞儀能夠統(tǒng)計(jì)出經(jīng)分離的Exosomes 的陽(yáng)性百分比，從而判斷Exosomes 的純度。

H460細(xì)胞上清經(jīng)Ribo Exosomes Isolation Reagent抽提，流式鑒定Exosomes表面標(biāo)志物CD63和CD81。

（注：實(shí)際檢測(cè)結(jié)果受不同樣本來源、樣本的純度等因素的影響，圖片僅供參考）

代表性客戶文章：

[1] Wang W, Li D B, Li R Y, et al. Diagnosis of hyperacute and acute ischaemic stroke: the potential utility of exosomal MicroRNA-21-5p and MicroRNA-30a-5p[J]. Cerebrovascular Diseases, 2018, 45(5-6): 204-212.

[2] Chen J, Yu Y, Li S, et al. Micro RNA‐30a ameliorates hepatic fibrosis by inhibiting Beclin1‐mediated autophagy[J]. Journal of cellular and molecular medicine, 2017, 21(12): 3679-3692.

委托科研服務(wù)：

03. 外泌體RNA測(cè)序服務(wù)【完成＞1500例外泌體RNA建庫(kù)，成功率＞95%】

a. 外泌體Small RNA測(cè)序

技術(shù)特色：

■ 3個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)深度挖掘及分析疾病相關(guān)miRNA biomarker；

■ 4個(gè)最新數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)靶基因，結(jié)果更準(zhǔn)確；

■ 可提供piRNA 差異分析（限定物種，人、大鼠、小鼠）；

■ 采用3 個(gè)外泌體或囊泡數(shù)據(jù)庫(kù)，注釋信息更完善，深入挖掘研究結(jié)果的佐證；

■ 提供腫瘤研究的臨床數(shù)據(jù)分析，使得分析結(jié)果更加飽滿。

b. 外泌體lncRNA測(cè)序

技術(shù)特色：

■ 采用3 個(gè)外泌體或囊泡數(shù)據(jù)庫(kù)，注釋信息更完善，深入挖掘研究結(jié)果的佐證；

■ 多種差異表達(dá)計(jì)算方法，可根據(jù)項(xiàng)目情況靈活選擇算法，展現(xiàn)更完美的數(shù)據(jù)；

■ 全新的比對(duì)軟件，分析速度更快，結(jié)果更準(zhǔn)確；

■ 提供腫瘤研究的臨床數(shù)據(jù)分析，使得分析結(jié)果更加飽滿。

代表性客戶文章：

[1] Jiang F, Chen Q, Wang W, et al. Hepatocyte-Derived extracellular vesicles promote endothelial inflammation and atherogenesis via microRNA-1[J]. Journal of Hepatology, 2020, 72(1): 156-166.

[2] Shang A, Gu C, Wang W, et al. Exosomal circPACRGL promotes progression of colorectal cancer via the miR-142-3p/miR-506-3p-TGF-β1 axis[J]. Molecular cancer, 2020, 19(1): 1-15.

[3] Huang W, Yan Y, Liu Y, et al. Exosomes with low miR-34c-3p expression promote invasion and migration of non-small cell lung cancer by upregulating integrin α2β1[J]. Signal Transduction and Targeted Therapy, 2020, 5(1): 1-13.

[4] Fang S B, Zhang H Y, Wang C, et al. Small extracellular vesicles derived from human mesenchymal stromal cells prevent group 2 innate lymphoid cell-dominant allergic airway inflammation through delivery of miR-146a-5p[J]. Journal of extracellular vesicles, 2020, 9(1): 1723260.

[5] Hou Z, Qin X, Hu Y, et al. Longterm exercise-derived exosomal miR-342-5p: a novel exerkine for cardioprotection[J]. Circulation research, 2019, 124(9): 1386-1400.

委托科研服務(wù)：

4. qPCR驗(yàn)證【自主專利產(chǎn)品】

a. miRNA qRT-PCR試劑盒

銳博生物提供擁有自主專利的莖環(huán)法和加尾法miRNA qPCR檢測(cè)試劑盒。【高靈敏度小RNA定量檢測(cè)方法及試劑盒，專利授權(quán)號(hào)：CA201410039162.6】

產(chǎn)品特點(diǎn)：

b. lncRNA qRT-PCR試劑盒

riboSCRIPT qRT-PCR Starter Kit 是銳博生物推出的基于SYBR Green I 嵌合熒光法的qRT-PCR 試劑盒，可實(shí)現(xiàn)lncRNA 或circRNA或mRNA 表達(dá)情況的快速、高效、準(zhǔn)確的檢測(cè)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

■ 擴(kuò)增效率高，特異性強(qiáng)

■ 靈敏度高，易于檢測(cè)

■ 使用方便，操作簡(jiǎn)單

代表性客戶文章：

[1] Sun Y, Wang Q, Zhang Y, et al. Multigenerational maternal obesity increases the incidence of HCC in offspring via miR-27a-3p[J]. Journal of Hepatology, 2020, 73(3): 603-615.

[2] Zhao Y, Zhao M F, Jiang S, et al. Liver governs adipose remodelling via extracellular vesicles in response to lipid overload[J]. Nature communications, 2020, 11(1): 1-17.

[3] Ma H, Chang H, Yang W, et al. A novel IFNα-induced long noncoding RNA negatively regulates immunosuppression by interrupting H3K27 acetylation in head and neck squamous cell carcinoma[J]. Molecular cancer, 2020, 19(1): 1-16.

[4] Qiao J, Zhao J, Chang S, et al. MicroRNA-153 improves the neurogenesis of neural stem cells and enhances the cognitive ability of aged mice through the notch signaling pathway[J]. Cell Death & Differentiation, 2020, 27(2): 808-825.

[5] Wu P, Cai J, Chen Q, et al. Lnc-TALC promotes O 6-methylguanine-DNA methyltransferase expression via regulating the c-Met pathway by competitively binding with miR-20b-3p[J]. Nature communications, 2019, 10(1): 2045.

產(chǎn)品訂購(gòu)：