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EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴團(tuán)在天然化合物中很少見,能夠在DNA復(fù)制時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在合成的DNA分子中。基于Apollo? 熒光染料與EdU的特異性反應(yīng),即可直接并準(zhǔn)確地檢測出DNA復(fù)制活性。EdU廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)、病毒復(fù)制等方面的研究,尤其適合siRNA、miRNA、小分子化合物及藥物的細(xì)胞增殖篩選實(shí)驗(yàn)。銳博生物具有EdU試劑盒的專利,擁有自主知識產(chǎn)權(quán)。【一種標(biāo)記活細(xì)胞內(nèi)核酸的方法和試劑盒? ?專利授權(quán)號:CA201010183211.5】C10338和C10310試劑盒合并,需要做EdU細(xì)胞增殖流式細(xì)胞術(shù)檢測時(shí)可直接使用C10310試劑盒。

產(chǎn)品優(yōu)勢

1、簡單:無需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法簡單高效,反應(yīng)僅需要幾分鐘
2、靈敏:無需抗體,檢測染料僅BrdU抗體的1/500,很容易擴(kuò)散,即便是單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測
3、快速:無需過夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個(gè)檢測周期僅需5小時(shí)
4、準(zhǔn)確:無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整
5、兼容:對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,能夠同時(shí)檢測細(xì)胞其他性狀特征
6、多種染料可選,適用于各種動(dòng)物細(xì)胞檢測,對植物細(xì)胞亦適用

選擇指南
多種染料可選

銳博生物EdU產(chǎn)品提供多種染料類型,覆蓋多個(gè)檢測通道,方便您輕松選擇適合的染料,最大限度地?cái)U(kuò)展第三方染色的適用范圍,最大限度地適合您的檢測儀器要求,幫助解決您的實(shí)驗(yàn)難題。

三種染料激發(fā)光譜和發(fā)射光譜(虛線:激發(fā)光譜;實(shí)線:發(fā)射光譜)
注:Apollo染色的化學(xué)反應(yīng)會(huì)使GFP,EGFP,R-PE失活,請選購該類產(chǎn)品時(shí)注意。

技術(shù)支持

采用3種染料分別檢測50uM EdU孵育2h的HeLa細(xì)胞(40X),采用高內(nèi)涵篩選平臺(BD pathway 855)檢測,其中Apollo?643染料檢測結(jié)果為灰度值,本圖片用紅色渲染。

簡單:無需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法簡單高效,反應(yīng)僅需要幾分鐘;

圖1 BrdU與EduU檢測方法原理示意圖

靈敏:無需抗體,檢測染料僅BrdU抗體的1/500,很容易擴(kuò)散,即便是單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測;

A549細(xì)胞系孵育30分鐘的細(xì)胞增殖情況

Hela細(xì)胞系孵育1小時(shí)的細(xì)胞增殖情況

3T3細(xì)胞孵育6小時(shí)的細(xì)胞增殖情況

快速:無需過夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個(gè)檢測周期僅需2.5小時(shí);

10X

20X

40X圖7 A549細(xì)胞系孵育2小時(shí)后的細(xì)胞增殖檢測(10X,20X,40X)

準(zhǔn)確:無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;

40X

圖8 BrdU需要DNA變性后才能與抗體結(jié)合,導(dǎo)致BrdU、Hoechst染色彌散,邊緣模糊不清;而EdU邊緣清晰完整,檢測更靈敏、更準(zhǔn)確

兼容:對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,能夠同時(shí)檢測細(xì)胞其他性狀特征。

EdU細(xì)胞增殖檢測方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)以及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn),更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記(如P65抗體)等進(jìn)行多重標(biāo)記,在細(xì)胞水平直接獲取細(xì)胞多維特征信息,更適合深入開展細(xì)胞功能方面的研究。

結(jié)合P65抗體和EdU,分析藥物對細(xì)胞增殖及NF-KB信號通路的影響

適用于各種動(dòng)物細(xì)胞檢測,對植物細(xì)胞亦適用:

EdU增殖檢測方法對各種細(xì)胞系均適用,簡單、靈敏、快速、準(zhǔn)確

植物細(xì)胞的細(xì)胞壁比較厚,對植物起著保護(hù)的作用,采用抗體檢測方法通常需要消化細(xì)胞壁,且容易帶來一些雜質(zhì)干擾,甚至破環(huán)細(xì)胞形態(tài),導(dǎo)致檢測的可靠性降低。EdU和Apollo?染料分子均很小,能夠輕易地透過細(xì)胞壁屏障,無需消化細(xì)胞壁,無需DNA變性及抗原抗體反應(yīng),即可準(zhǔn)確地檢測植物生長,發(fā)育,分化等性狀。

應(yīng)用EdU檢測植物細(xì)胞生長分化(Kotogány E, et al. Plant Methods. 2010)

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  • Yang Y, Fan X, Yan J, et al. A comprehensive epigenome atlas reveals DNA methylation regulating skeletal muscle development[J]. Nucleic Acids Research, 2021.EdU細(xì)胞成像)
  • Qu S, Jiao Z, Lu G, et al. PD-L1 lncRNA splice isoform promotes lung adenocarcinoma progression via enhancing c-Myc activity[J]. Genome Biology, 2021, 22(1): 1-24.EdU細(xì)胞成像)
  • Wang L, Wang C, Wang Z, et al. Transforming the spleen into a liver-like organ in vivo[J]. Science Advances, 2020, 6(24): eaaz9974.(動(dòng)物用EdU細(xì)胞成像)
  • Zhang W, Cai G, Ding Y, et al. Myofiber necroptosis promotes muscle stem cell proliferation via releasing Tenascin-C during regeneration[J]. Cell Research, 2020: 1-15.(動(dòng)物用EdU細(xì)胞流式檢測)
  • Xue S T, Li K, Gao Y, et al. The role of the key autophagy kinase ULK1 in hepatocellular carcinoma and its validation as a treatment target[J]. Autophagy, 2020, 16(10): 1823-1837.EdU細(xì)胞流式檢測)
  • Wei Z, Zhang Y, Chen J, et al. Pathogenic CARD11 mutations affect B cell development and differentiation through a noncanonical pathway[J]. Science immunology, 2019, 4(41).(動(dòng)物用EdU細(xì)胞流式檢測)

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產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱目錄價(jià)數(shù)量操作
C00003 試劑A EdU溶液, 1000X,20uL¥800.00
C10310-1 Cell-Light EdU Apollo567 In Vitro Kit(100T)¥1,500.00
C10310-2 Cell-Light EdU Apollo643 In Vitro Kit(100T)¥1,500.00
C10310-3 Cell-Light EdU Apollo488 In Vitro Kit(100T)¥1,500.00
C00052 EdU 2mg¥2,580.00
C00053 EdU 10mg¥3,880.00
C00054 EdU 50mg¥5,180.00

 

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