MicrOFFTM?miRNA antagomir是經(jīng)過(guò)特殊化學(xué)修飾的miRNA拮抗劑，可直接注射于動(dòng)物體內(nèi)，用于抑制內(nèi)源性miRNA。與普通抑制劑相比，動(dòng)物用miRNA antagomir具有更高的穩(wěn)定性和抑制效果，更易通過(guò)細(xì)胞膜、細(xì)胞間隙而富集于靶細(xì)胞。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中antagomir通常可以通過(guò)系統(tǒng)或局部注射等方法進(jìn)行給藥。關(guān)于科研實(shí)驗(yàn)中的給藥方式一般沒(méi)有固定的模式，給藥方式應(yīng)該根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)靈活設(shè)計(jì)，在實(shí)際實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不斷調(diào)整調(diào)整和優(yōu)化。
小編之前已經(jīng)給大家整理一些關(guān)于動(dòng)物用antagomir產(chǎn)品的客戶應(yīng)用案例，詳情請(qǐng)見(jiàn)：動(dòng)物用miRNA antagomir案例應(yīng)用策略解析(20210630)丨含動(dòng)物造模、實(shí)驗(yàn)處理、給藥方式、給藥劑量……
本期文章小編給大家?guī)?lái)的是關(guān)于動(dòng)物用miRNA antagomir給藥方式的客戶應(yīng)用案例，希望能夠?qū)φ诨蚣磳⒁鰟?dòng)物實(shí)驗(yàn)的各位小伙伴有一定的幫助！
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銳博生物miRNA antagomir
中文名：miRNA拮抗劑
功能：抑制內(nèi)源性的miRNA
純化方式：in vivo（又稱Standard in vivo）
穩(wěn)定性：經(jīng)特殊化學(xué)修飾，穩(wěn)定性高
給藥方式：局部給藥(5-20 nmol)；系統(tǒng)給藥(50-200 nmol)
作用方式：單鏈RNA，通過(guò)與體內(nèi)的成熟miRNA強(qiáng)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，阻止miRNA與其靶基因mRNA的互補(bǔ)配對(duì)，抑制miRNA發(fā)揮作用
應(yīng)用案例1：
Theranostics（IF11.556）丨Exosomes-mediated Transfer of miR-125a/b in Cell-to-cell Communication: A Novel Mechanism of
Genetic Exchange in the Intestinal Microenvironment
研究模型：短腸綜合征（雄性SD大鼠采用小腸大塊切除術(shù)和部分結(jié)腸切除術(shù)誘導(dǎo)短腸綜合征[SBS]）
動(dòng)物模型：短腸綜合征SD大鼠模型（實(shí)驗(yàn)組：注射miR-125a antagomir；對(duì)照組：注射NC antagomir）
給藥方式：腹腔注射
給藥劑量：120nmol/kg
給藥頻率：每2天注射1次
Fig1. 注射miR-125a antagomir通過(guò)挽救MCL1的抑制來(lái)增強(qiáng)腸上皮增殖并減少體內(nèi)腸上皮細(xì)胞凋亡
參考文獻(xiàn)：Cheng W, Wang K, Zhao Z, et al. Exosomes-mediated transfer of miR-125a/b in cell-to-cell communication: a novel mechanism of genetic exchange in the intestinal microenvironment[J].?Theranostics, 2020, 10(17): 7561.
應(yīng)用案例2：
Theranostics（IF11.556）丨Denervation drives skeletal muscle atrophy and induces mitochondrial dysfunction, mitophagy and
apoptosis via miR-142a-5p/MFN1 axis
研究模型：骨骼肌萎縮（對(duì)10周齡雄性C57BL/6J小鼠的右后腿進(jìn)行去神經(jīng)手術(shù)，構(gòu)建右后肢去神經(jīng)小鼠模型）
動(dòng)物模型：右后肢去神經(jīng)小鼠模型（隨機(jī)分為6組，分別為sham對(duì)照組、去神經(jīng)組、去神經(jīng)+ miR-142a-5p antagomir組、去神經(jīng)+ miR-142a-5p agomir、去神經(jīng)+ rAAV-MFN1組、去神經(jīng)+ miR-142a-5p agomir + rAAV-MFN1組）
給藥方式：腓腸肌內(nèi)注射
給藥劑量：10nmol antagomir
給藥頻率：每3天一次，連續(xù)2周
Fig2. miR-142a-5p antagomir給藥減弱了去神經(jīng)支配的腓腸肌萎縮，并產(chǎn)生了比去神經(jīng)組更大的纖維直徑轉(zhuǎn)變
參考文獻(xiàn)：Yang X, Xue P, Chen H, et al. Denervation drives skeletal muscle atrophy and induces mitochondrial dysfunction, mitophagy and apoptosis via miR-142a-5p/MFN1 axis[J].?Theranostics, 2020, 10(3): 1415.
應(yīng)用案例3：
Clinical and translational medicine（IF11.492）丨Role of miR‐466 in mesenchymal stromal cell derived extracellular vesicles
treating inoculation pneumonia caused by multidrug‐resistant Pseudomonas aeruginosa
研究模型：綠膿假單胞菌多重耐藥[MDR-PA]誘導(dǎo)的肺炎（8-10周雄性C57BL/6小鼠通過(guò)尾靜脈注射antagomir，24h后通過(guò)氣管內(nèi)接種綠膿假單胞菌[PA]以誘導(dǎo)肺炎小鼠模型）
動(dòng)物模型：8-10周雄性C57BL/6小鼠（實(shí)驗(yàn)組：注射antagomiR-466；對(duì)照組：注射scramble antagomiR）
給藥方式：尾靜脈注射
給藥劑量：10 mg/kg·bw
給藥頻率：氣管內(nèi)接種PA（綠膿假單胞菌）之前24h接種1次
Fig3. 注射antagomiR-466使得BALF中白細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的流入量顯著高于對(duì)照組，且BALF中的TNF-α、IL-6和總蛋白濃度顯著增加
參考文獻(xiàn)：Shi M, Zhu Y, Yan J, et al. Role of miR‐466 in mesenchymal stromal cell derived extracellular vesicles treating inoculation pneumonia caused by multidrug‐resistant Pseudomonas aeruginosa[J].?Clinical and translational medicine, 2021, 11(1): e287.
應(yīng)用案例4：
Journal of Experimental & Clinical Cancer Research（IF11.160）丨Circular RNA circ_001422 promotes the progression and
metastasis of osteosarcoma via the miR-195-5p/FGF2/PI3K/Akt axis
疾病模型：骨肉瘤（①將懸浮于100μl PBS中的5×106個(gè)穩(wěn)定143B細(xì)胞皮下注射至裸鼠右肢，建立皮下移植瘤模型；②將懸浮于200μl PBS中的2×106個(gè)143B細(xì)胞通過(guò)尾靜脈注射到裸鼠體內(nèi)以模擬腫瘤轉(zhuǎn)移，建立肺轉(zhuǎn)移模型）
動(dòng)物模型：①皮下異種移植模型；②肺轉(zhuǎn)移模型（分為4組，對(duì)照組、sh-circ_001422組、sh-circ_001422?+?miR-195-5p antagomir（anta）組、sh-circ_001422?+?miR-195-5p antagomir + sh-FGF2組）
給藥方式：①瘤內(nèi)注射；②尾靜脈注射
給藥劑量：/
給藥頻率：每周2次，共2周
Fig4. 注射miR-195-5p antagomir消除了circ_001422沉默的影響，并加速了OS細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移
參考文獻(xiàn)：Yang B, Li L, Tong G, et al. Circular RNA circ_001422 Promotes Progression and Metastasis of Osteosarcoma via the miR-195-5p/FGF2/PI3K/Akt Axis[J].?Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2021.
應(yīng)用案例5：
Advanced Healthcare Materials（IF9.934）丨Antagomir-155 Attenuates Acute Cardiac Rejection Using Ultrasound Targeted
Microbubbles Destruction
研究模型：急性心臟排斥、心臟移植（本研究以BALB/c (H-2d)為供體，C57BL/6 (H-2b)為受體。在異氟醚吸入麻醉下，將供體心臟移植到異位腹部位置，以構(gòu)建腹腔異位心臟移植小鼠模型）
動(dòng)物模型：腹腔異位心臟移植小鼠模型（分為antagomir-155組、對(duì)照組）
給藥方式：靜脈注射
給藥劑量：0.8nmol
給藥頻率：心臟移植后第1、3、5天分別注射1次
Fig5. 注射antagomir-155下調(diào)了細(xì)胞因子的表達(dá)和炎癥浸潤(rùn)，同種異體移植物存活時(shí)間明顯延長(zhǎng)
參考文獻(xiàn)：Yi L, Chen Y, Jin Q, et al. Antagomir‐155 Attenuates Acute Cardiac Rejection Using Ultrasound Targeted Microbubbles Destruction[J].?Advanced Healthcare Materials, 2021, 10(2): 2002225.
應(yīng)用案例6：
Molecular Therapy-Nucleic Acids（IF8.886）丨lncRNA NEAT1 Binds to MiR-339-5p to Increase HOXA1 and Alleviate Ischemic
Brain Damage in Neonatal Mice
疾病模型：缺血性腦損傷（基于Rice-Vannucci方法，通過(guò)右頸總動(dòng)脈閉塞建立新生HIBD小鼠模型。在異氟醚麻醉下，解剖顯微鏡下在小鼠頸部中線做一個(gè)切口，分離右側(cè)頸總動(dòng)脈，然后使用6-0縫合線在遠(yuǎn)端和近端進(jìn)行雙結(jié)扎。2h后，將小鼠移至恒溫、含8%氧氣和92%氮?dú)獾拿荛]缺氧容器中1h）
動(dòng)物模型：缺氧缺血性腦損傷[HIBD]小鼠模型（分為6組，sham組、HIBD模型組、shRNA-NEAT1組、shRNA-NC組、miR-339-5p-antagomir組、shRNA-NEAT1+ miR-339-5p-antagomir組）
給藥方式：側(cè)腦室注射
給藥劑量：/
給藥頻率：連續(xù)注射7天
Fig6. 注射miR-339-5p-antagomir可減輕由sh-NEAT1導(dǎo)致的腦損傷加重及凋亡神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量的升高
參考文獻(xiàn)：Zhao J, He L, Yin L. lncRNA NEAT1 binds to miR-339-5p to increase HOXA1 and alleviate ischemic brain damage in neonatal mice[J].?Molecular Therapy-Nucleic Acids, 2020, 20: 117-127.
應(yīng)用案例7：
Molecular Therapy-Nucleic Acids（IF8.886）丨Notch activation promotes endothelial quiescence by repressing MYC expression
via miR-218
疾病模型：血管生成/血管化
動(dòng)物模型：C57BL/6小鼠（實(shí)驗(yàn)組：miR-218 antagomiR處理；對(duì)照組：control antagomir處理）
給藥方式：玻璃體內(nèi)注射
給藥劑量：0.2?nmol
給藥頻率：注射1次
Fig7. 注射miR-218 antagomiR可促進(jìn)視網(wǎng)膜脈管系統(tǒng)的發(fā)育
參考文獻(xiàn)：Sun J X, Dou G R, Yang Z Y, et al. Notch activation promotes endothelial quiescence by repressing MYC expression via miR-218[J].?Molecular Therapy-Nucleic Acids, 2021, 25: 554-566.
更多動(dòng)物用miRNA antagomir應(yīng)用案例持續(xù)更新中，敬請(qǐng)期待……
