銳博生物miRNA agomir
中文名：miRNA激動劑
功能：模仿內(nèi)源性的miRNA
純化方式：in vivo（Standard in vivo）
穩(wěn)定性：經(jīng)特殊化學(xué)修飾，穩(wěn)定性高
給藥方式：局部給藥(1-10 nmol)；系統(tǒng)給藥(5-20 nmol)
作用方式：雙鏈RNA，作用鏈為正義鏈，通過模擬miRNA進(jìn)入miRISC復(fù)合物來調(diào)節(jié)靶mRNA的表達(dá)而發(fā)揮作用
應(yīng)用案例1：
Journal of Hepatology（IF20.583）丨Multigenerational maternal obesity increases the incidence of HCC in offspring via miR-27a-3p
疾病模型：肥胖、肝細(xì)胞癌（懷孕的C57BL/6雌性小鼠尾靜脈注射PBS或miR-27a-3p agomir，p15雄性子代斷奶后維持NC和高脂飲食(HFD)，并通過腹腔注射二乙基亞硝胺DEN以誘導(dǎo)HCC）
動物模型：高脂飲食誘導(dǎo)的多代肥胖模型（分為4組，分別為Control+NC組、Agomir+NC組、Control+HFD組和Agomir+HFD組。以NC喂養(yǎng)的雄性小鼠作為對照）
給藥方式：尾靜脈注射
給藥劑量：在E12.5時，每只小鼠5μmol；E14.5至E18.5期間，每只小鼠3μmol
給藥頻率：在E12.5時注射1次，E14.5至E18.5期間每隔一天注射1次
Fig1.母親注射了miR-27a-3p agomir的后代中，無論飲食如何，腫瘤數(shù)量顯著增加；且HFD條件下的子代腫瘤負(fù)擔(dān)更重
應(yīng)用案例2：
Advanced Science（IF15.844）丨Targeting YAP1/LINC00152/FSCN1 Signaling Axis Prevents the Progression of Colorectal Cancer
疾病模型：結(jié)直腸癌（首先，用miR-185-3p agomir、miR-632 agomir和control agomir處理LINC00152穩(wěn)定過表達(dá)或含空載的HCT116細(xì)胞24h，然后將2×106個細(xì)胞的單細(xì)胞懸液接種于小鼠的背側(cè)或注射于小鼠的尾靜脈）
動物模型：異種移植裸鼠模型、“尾靜脈-肺轉(zhuǎn)移”裸鼠模型（隨機(jī)分為4組，分別為agomir NC組、LINC00152過表達(dá)+agomir NC組、LINC00152過表達(dá)+ miR-185-3p agomir組和LINC00152過表達(dá)+ miR-632 agomir組）
給藥方式：瘤內(nèi)注射、尾靜脈注射
給藥劑量：150 μL, 200 × 10?9?M
給藥頻率：瘤內(nèi)注射1次（第15天），尾靜脈注射2次（第30天和第45天）
Fig2. 注射miR-185-3p和miR-632 agomirs降低了裸鼠移植瘤的生長和轉(zhuǎn)移瘤的肺致瘤性
應(yīng)用案例3：
Molecular Cancer（IF15.302）丨LINC00173.v1 promotes angiogenesis and progression of lung squamous cell carcinoma by sponging miR-511-5p to regulate VEGFA expression
疾病模型：肺鱗狀細(xì)胞癌（至少6-8只4-6周齡BALB/c-nu小鼠，每組隨機(jī)分配不同體重的小鼠。移植腫瘤實(shí)驗(yàn)，將1-4×106?個NCI-H1975細(xì)胞皮下注射接種于裸鼠腹股溝褶，以構(gòu)建異種移植裸鼠模型。7天后，NCI-H1975–LINC00173.v1接種小鼠隨機(jī)分為3組進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)）
動物模型：異種移植裸鼠模型（隨機(jī)分為3組，分別為貝伐單抗組、agomir-511-5p組和對照組）
給藥方式：腹腔注射
給藥劑量：10?μmol
給藥頻率：每周1次，共4周
Fig3. 注射agomir-511-5p可有效抑制LINC00173.v1過表達(dá)的NCI-H1975細(xì)胞的致瘤能力，甚至達(dá)到與貝伐單抗治療相當(dāng)?shù)乃?/strong>
應(yīng)用案例4：
Nature Communications（IF12.121）丨miR-135a-5p mediates memory and synaptic impairments via the Rock2/Adducin1 signaling pathway in a mouse model of Alzheimer’s disease
疾病模型：阿爾茨海默病（雄性APP/PS1小鼠購買于Jackson實(shí)驗(yàn)室，選擇8月齡APP/PS1小鼠進(jìn)行agomir注射，因?yàn)?月齡小鼠的記憶障礙明顯）
動物模型：8月齡APP/PS1小鼠模型（實(shí)驗(yàn)組：注射miR-135a-5p agomir；對照組：注射scramble agomir）
給藥方式：海馬體注射
給藥劑量：/
給藥頻率：將miR-135a-5p agomir (Ago)或scramble (Scr)注射到8月齡APP/PS1小鼠或野生型同窩幼崽的CA1區(qū)域。4周后，對小鼠進(jìn)行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)、電生理記錄、western blotting和高爾基染色。
Fig4. 海馬體注射miR-135a-5p agomir (Ago)可以挽救AD小鼠的記憶損傷
應(yīng)用案例5：
Theranostics（IF8.577）丨Human umbilical cord-derived mesenchymal stem cell therapy ameliorates lupus through increasing CD4+ T cell senescence via MiR-199a-5p/Sirt1/p53 axis
疾病模型：系統(tǒng)性紅斑狼瘡（雌性MRL/lpr小鼠購買于上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動物有限責(zé)任公司，選擇17周齡MRL/lpr小鼠模型進(jìn)行agomir注射）
動物模型：MRL/lpr狼瘡小鼠模型（每組6只，實(shí)驗(yàn)組：注射miR-199a-5p agomir；對照組：注射agomir NC）
給藥方式：尾靜脈注射
給藥劑量：20nmol（agomir稀釋于0.2ml生理鹽水中）
給藥頻率：每4天一次，連續(xù)4周
Fig5. 尾靜脈注射MiR-199a-5p agomir可改善MRL/lpr小鼠的疾病表型和免疫紊亂
應(yīng)用案例6：
JCI Insight（IF6.206）丨Epithelial miR-206 targets CD39/extracellular ATP to upregulate airway IL-25 and TSLP in type 2-high asthma
疾病模型：哮喘（采用HDM敏化和激發(fā)的方法建立動物模型。即雌性C57BL/6小鼠在第0、7和14天通過腹腔注射100μL凍干HDM提取物溶液（0.1 mg/mL）和Al(OH)3佐劑，并在第21、22和23天鼻腔給藥40μL HDM溶液(3 mg/mL)或生理鹽水。第20天和第22天鼻腔給藥miR-206 agomir、對照agomir）
動物模型：變應(yīng)性氣道炎癥小鼠模型（實(shí)驗(yàn)組：miR-206 agomir處理；對照組：control agomir處理）
給藥方式：鼻腔給藥
給藥劑量：5nmol（agomir稀釋于40μL生理鹽水中）
給藥頻率：第20天、22天給藥
Fig6. 鼻腔給藥miR-206 agomir顯著抑制了HDM誘導(dǎo)的Cd39表達(dá)，并進(jìn)一步增強(qiáng)了HDM誘導(dǎo)的ATP濃度的增加
應(yīng)用案例7：
Gastroenterology（IF17.373）丨MicroRNAs 15A and 16–1 Activate Signaling Pathways That Mediate Chemotaxis of Immune Regulatory B cells to Colorectal Tumors
疾病模型：結(jié)直腸癌（通過氧化偶氮甲烷加右旋糖酐硫酸酯鈉[ DSS ]誘導(dǎo)小鼠結(jié)直腸癌病變，即7周齡雌性WT或KO小鼠[ MIR15A和MIR16-1缺失 ]腹腔注射10 mg/kg bw的氧化偶氮甲烷，陰性對照注射0.9% NaCl溶液。5天后，在飲用水中以2.5％的最終濃度給藥DSS，持續(xù)7天，然后是14天的正常飲水。此過程重復(fù)3次。）
動物模型：CRC小鼠（實(shí)驗(yàn)組：注射MIR15A和MIR16-1 agomir；對照組：注射agomir NC）
給藥方式：靜脈注射
給藥劑量：5 nmol（agomir稀釋于0.1ml磷酸鹽緩沖鹽水中）
給藥頻率：每4天一次，連續(xù)注射15次
Fig7. 注射MIR15A和MIR16-1 agomir的小鼠腫瘤生長更加緩慢
應(yīng)用案例8：
Nature Communications（IF12.121）丨CircAnks1a in the spinal cord regulates hypersensitivity in a rodent model of neuropathic pain
疾病模型：采用L5/L6脊神經(jīng)結(jié)扎的方法制備大鼠神經(jīng)性疼痛模型。在注射戊巴比妥鈉（50 mg kg-1，i.p.）后，將聚乙烯10（PE10）導(dǎo)管植入L5/L6椎間蛛網(wǎng)膜下腔中；導(dǎo)管尖端定位在L4–L6脊髓節(jié)段水平之間。然后使大鼠恢復(fù)5天。表現(xiàn)出后肢麻痹或癱瘓的動物被排除在研究之外。
動物模型：SNL（脊神經(jīng)結(jié)扎）處理大鼠（實(shí)驗(yàn)組：注射agomir或antagomir；對照組：注射agomir control或antagomir control）
給藥方式：鞘內(nèi)注射
給藥劑量：1nmol/d agomir；1nmol/d antagomir
給藥頻率：每天一次，連續(xù)注射5天
圖8. CircAnks1a通過靶向miR-324-3p調(diào)控VEGFB的表達(dá)
