銳博生物提供專業(yè)可靠的lncRNA、circRNA、mRNA qRT-PCR檢測服務,能夠確保基因表達檢測實驗的高靈敏及準確性。
lncRNA qRT-PCR實驗服務
qRT-PCR技術以其高靈敏度及高準確性,已成為RNA表達豐度檢測的一個重要標準,二代測序及芯片數(shù)據(jù)往往都需要qRT-PCR檢測進行驗證,常規(guī)實驗中的相對定量檢測或絕對定量檢測,qRT-PCR也是最合適的方法。
目前數(shù)據(jù)庫對lncRNA序列的收錄及注釋都不完備,大部分lncRNA的表達豐度也比較低,對lncRNA引物設計策略及qRT-PCR檢測提出了一定的挑戰(zhàn)。銳博生物有著豐富的lncRNA引物設計經(jīng)驗及qRT-PCR檢測經(jīng)驗,為lncRNA檢測提供真實而可靠的結果。
技術支持或應用實例
circRNA qRT-PCR實驗服務
環(huán)狀RNA是近年來非常受關注的一類單鏈閉環(huán)RNA,由RNA初級轉錄產(chǎn)物通過back-splicing而形成,除了成環(huán)junction之外,其它部分序列與線性轉錄本是一樣的,故需通過divergent引物進行RT-PCR或qRT-PCR檢測,而同一個線性轉錄本有可能剪切加工成多種circRNA,也會對circRNA的引物設計和檢測帶來更多的復雜性。銳博生物在circRNA引物設計及qRT-PCR檢測方面有豐富的實踐經(jīng)驗,從引物設計到qRT-PCR檢測,都可以提供合適的方案及可靠的結果。

divergent primer示意圖
circRNA鑒定實驗服務
環(huán)狀RNA(circRNA)是一類單鏈閉環(huán)RNA,一般由轉錄出來的線性RNA通過back-splicing而形成。由于RNA加工過程存在多樣化的可變剪切,往往需要對高通量測序及生信分析得到的circRNA進行鑒定,包括對splice junction進行鑒定以及對circRNA的序列組成進行鑒定。下圖為鑒定實驗示意圖,其中Forward Primer-1及Reverse Primer可以組合進行PCR或qPCR,對進行常規(guī)的circRNA表達豐度進行檢測及對擴增產(chǎn)物進行測序以鑒定splice junction的確切序列(用過表達載體表達的circRNA成環(huán)準確性也可使用該對引物鑒定),而Forward Primer-2及Reverse Primer組合PCR的產(chǎn)物進行測序則可鑒定circRNA的序列組成。


