肝細(xì)胞癌（HCC）是世界范圍內(nèi)最普遍和致命的人類惡性腫瘤之一。盡管HCC治療在過去幾十年中得到了顯著改善，但在許多國家，HCC的發(fā)病率和癌癥特異性死亡率仍在持續(xù)上升，這主要是由于對(duì)其潛在分子發(fā)病機(jī)制的了解有限，以及現(xiàn)有的可用HCC療法有限。因此，需要更多的研究來更深入地了解驅(qū)動(dòng)HCC進(jìn)展的病理過程。

小核仁RNAs（snoRNAs）是一種長(zhǎng)度為60~300個(gè)核苷酸的保守非編碼RNAs。它們因其作為小核仁核糖核蛋白（snoRNPs）在核糖體RNAs（rRNAs）的轉(zhuǎn)錄后修飾和成熟中的指導(dǎo)作用而聞名。相應(yīng)地，snoRNAs由于在rRNA成熟中發(fā)揮了關(guān)鍵作用而被認(rèn)為具有管家功能。盡管如此，snoRNAs的其他功能在很大程度上仍然未知。然而，有證據(jù)表明，snoRNAs參與腫瘤發(fā)生并且可以作為各種癌癥的預(yù)后標(biāo)志物。據(jù)報(bào)道，SNORA23在人胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC）中上調(diào)，并通過增加SYNE2的表達(dá)促進(jìn)PDAC細(xì)胞增殖和侵襲。在HCC中，通過腺相關(guān)病毒的體內(nèi)基因靶向?qū)?dòng)子-增強(qiáng)子整合到小鼠Rian基因中可以引發(fā)HCC。Rain中編碼的snoRNA在腫瘤組織中表達(dá)上調(diào)，這表明snoRNA的上調(diào)可能在HCC中發(fā)揮致癌作用。此外，研究發(fā)現(xiàn)SNORD113-1通過分別使MAPK/ERK和TGF-β通路中ERK1/2和SMAD2/3的磷酸化失活來抑制HCC的腫瘤發(fā)生。這些研究暗示了snoRNA在HCC形成和進(jìn)展中起著關(guān)鍵作用。SNORD17是一種C/D box snoRNA，首先在小鼠中發(fā)現(xiàn)，并被認(rèn)為是指導(dǎo)rRNA的2′-O-核糖甲基化。然而，SNORD17是否以及如何參與HCC進(jìn)程仍不清楚。

腫瘤抑制因子p53是一種有效的轉(zhuǎn)錄因子。它可以響應(yīng)DNA損傷或致癌基因的異常激活而被激活，從而導(dǎo)致多種細(xì)胞過程的誘導(dǎo)，包括細(xì)胞周期停滯、細(xì)胞凋亡和衰老。p53在癌癥（包括HCC）中經(jīng)常因突變或缺失而失活。此外，研究表明，p53的翻譯后修飾，如泛素化、磷酸化和乙酰化，也參與了p53的失活，而p53在HCC進(jìn)展中起著至關(guān)重要的作用。許多非編碼RNAs被發(fā)現(xiàn)在p53信號(hào)網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮關(guān)鍵作用，包括miRNA和lncRNA。然而，snoRNAs在p53網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)中的確切作用仍有待闡明。

近日，Cell Death & Differentiation（IF15.828）期刊在線發(fā)表了題為Non-coding small nucleolar RNA SNORD17 promotes the progression of hepatocellular carcinoma through a positive feedback loop upon p53 inactivation的研究論文。報(bào)道了非編碼小核仁RNA SNORD17在p53失活時(shí)通過NPM1/MYBBP1A介導(dǎo)的正反饋回路促進(jìn)HCC進(jìn)展的分子機(jī)制。靶向SNORD17的ASOs成功地阻止了小鼠異種移植模型中的腫瘤生長(zhǎng)，這為控制難治性HCC提供了一種潛在的策略。

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為了鑒定與HCC臨床特征相關(guān)的snoRNAs，研究人員通過分析來自GEO（Gene Expression Omnibus）數(shù)據(jù)庫和臨床HCC樣本的HCC相關(guān)微陣列數(shù)據(jù)集，發(fā)現(xiàn)與正常肝組織相比，SNORD17在HCC組織中表達(dá)上調(diào)，并且SNORD17的高表達(dá)預(yù)示著HCC患者的不良預(yù)后，尤其是在野生型p53患者中。

Fig1. 將SNORD17鑒定為HCC中臨床相關(guān)的snoRNA

為了闡明SNORD17在HCC中的作用，研究人員通過功能缺失性實(shí)驗(yàn)將HCC細(xì)胞系中的SNORD17敲除或敲低，結(jié)果發(fā)現(xiàn)SNORD17的缺失顯著抑制了細(xì)胞增殖、集落形成和G1/S期轉(zhuǎn)變，此外，晚期凋亡細(xì)胞也增多；過表達(dá)SNORD17則得到相反的結(jié)果。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)顯示SNORD17的缺失顯著降低了原位肝腫瘤體積和腫瘤重量，此外，在肺轉(zhuǎn)移模型中，SNORD17的缺失導(dǎo)致小鼠肺轉(zhuǎn)移減少。表明SNORD17在體內(nèi)促進(jìn)HCC的腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移。

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Fig2. SNORD17在體內(nèi)外促進(jìn)HCC細(xì)胞的增殖、細(xì)胞周期進(jìn)程和凋亡抗性

機(jī)制研究顯示，SNORD17通過同時(shí)結(jié)合NPM1（核仁磷酸蛋白1）和MYBBP1A（MYB結(jié)合蛋白1a）從而將它們錨定在核仁中。SNORD17的缺失促進(jìn)了NPM1和MYBBP1A易位到核質(zhì)中，導(dǎo)致NPM1/MDM2介導(dǎo)的穩(wěn)定性和MYBBP1A/p300介導(dǎo)的p53的激活。有趣的是，p300介導(dǎo)的p53乙酰化反過來通過與SNORD17的啟動(dòng)子結(jié)合來抑制SNORD17的表達(dá)，從而在SNORD17和p53之間形成了一個(gè)正反饋環(huán)。

Fig3.?SNORD17、MYBBP1A、NPM1和P53在HCC中調(diào)節(jié)腫瘤進(jìn)展的分子機(jī)制示意圖

最后，為了驗(yàn)證SNORD17作為體內(nèi)潛在抗腫瘤靶點(diǎn)的有效性，研究人員用SNORD17 ASO或?qū)φ誂SO給藥攜帶HepG2細(xì)胞的小鼠。結(jié)果發(fā)現(xiàn)SNORD17 ASO顯著抑制了皮下和原位腫瘤的生長(zhǎng)。此外，在SNORD17 ASO治療小鼠的皮下腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)SNORD17的表達(dá)降低和p53蛋白水平升高。表明SNORD17是HCC治療的一個(gè)有希望的靶點(diǎn)。

Fig4. SNORD17是HCC治療的潛在靶點(diǎn)

總之，本研究表明SNORD17通過組成性抑制HCC中的p53信號(hào)傳導(dǎo)來驅(qū)動(dòng)癌癥進(jìn)展，并可能代表了一個(gè)潛在的HCC治療靶點(diǎn)。

原文鏈接：https://www.nature.com/articles/s41418-022-00929-w#Abs1

本研究使用到的snoRNA ASO及NC、siRNA及NC、動(dòng)物用ASO、EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒、FISH探針&試劑盒由銳博生物提供！