研究發(fā)現(xiàn)，外泌體作為一類含有DNA、RNA、蛋白質(zhì)和脂類的微囊，廣泛參與調(diào)控重要的細(xì)胞生理活動(dòng)。外泌體RNA特別是非編碼RNA，在不同的疾病模型中存在明顯的表達(dá)差異，有望成為疾病診斷、個(gè)性化治療和預(yù)后的重要分子標(biāo)志物，并揭示疾病發(fā)生的機(jī)理。利用高通量轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)可以同時(shí)檢測其所含有的RNA分子（如miRNA、lncRNA），從而對外泌體RNA的鑒定和功能調(diào)控進(jìn)行深入研究。
因此，使用Ribo?Exosome Isolation Reagent提取的外泌體產(chǎn)物，通過粒徑分析和表面蛋白標(biāo)記物鑒定之后，就可以利用外泌體RNA測序技術(shù)來篩選差異表達(dá)的目標(biāo)RNAs分子，后續(xù)研究可以圍繞外泌體RNA的功能與作用機(jī)制或者鑒定RNA標(biāo)志物以開發(fā)體液診斷試劑盒~~~
■ 銳博生物外泌體RNA測序
■ 結(jié)合自主專利外泌體抽提技術(shù)
■ 先進(jìn)的微量建庫技術(shù)
■ 采用NEB進(jìn)口建庫試劑，僅需ng級別RNA
■ 成功率＞95%，成功合作項(xiàng)目＞4000例
小提琴圖
環(huán)化熱圖
基因功能富集分析圖
miRNA-靶基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)
ceRNA網(wǎng)絡(luò)分析
lncRNA-靶基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)
客戶相關(guān)科研成果發(fā)表在諸如Journal of Hepatology、Circulation Research、Molecular Cancer、Signal Transduction and Targeted Therapy、Journal of Extracellular Vesicles等國際知名期刊！
外泌體small RNA測序
| 測序內(nèi)容 | 推薦測序模式 | 建庫方式 |
| siBDM0001-5 | HiSeq 2500, SE50,10M clean reads（3條siRNA，各5nmol） | RNA末端接頭法 |
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技術(shù)特色：
? 專利外泌體抽提技術(shù)，配合特有微量RNA建庫方法，提供miRNA測序整體服務(wù)
? 3個(gè)數(shù)據(jù)庫深度挖掘及分析疾病相關(guān)miRNA biomarker；
? 4個(gè)最新數(shù)據(jù)庫預(yù)測靶基因，結(jié)果更準(zhǔn)確；
? 可提供piRNA 差異分析（限定物種，人、大鼠、小鼠）；
? 采用3 個(gè)外泌體或囊泡數(shù)據(jù)庫，注釋信息更完善，深入挖掘研究結(jié)果的佐證；
? 提供腫瘤研究的臨床數(shù)據(jù)分析，使得分析結(jié)果更加飽滿。
應(yīng)用案例：
Journal of Hepatology丨Hepatocyte-Derived Extracellular Vesicles Promote Endothelial Inflammation and Atherogenesis via microRNA-1
臨床證據(jù)表明非酒精性脂肪肝(NAFLD)與心血管疾病(CVD)密切相關(guān)。然而，其潛在機(jī)制仍有待闡明。為了探討NAFLD狀態(tài)下肝細(xì)胞來源的細(xì)胞外囊泡（EVs）在內(nèi)皮炎癥和動(dòng)脈粥樣硬化形成中的潛在作用。研究人員分離了正常對照和DIO小鼠肝細(xì)胞來源的EVs，提取EVs總RNAs，構(gòu)建small RNA文庫并進(jìn)行小RNA測序以確定EVs中miRNA表達(dá)譜變化。
? EVs miRNA表達(dá)譜差異：
結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對照肝細(xì)胞釋放的EV相比，脂肪肝細(xì)胞釋放更多的EVs，并能顯著改變miRNA表達(dá)譜。與脂肪肝細(xì)胞共培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞（或用肝細(xì)胞釋放的EVs或miR-1處理的內(nèi)皮細(xì)胞）中表達(dá)的促炎分子明顯更多，并可增加NF-κB活性和降低KLF4表達(dá)。
? miR-1體內(nèi)外功能鑒定：
下調(diào)或抑制miR-1可預(yù)防EV誘導(dǎo)的內(nèi)皮炎癥。盡管miR-1治療抑制了KLF4的表達(dá)和報(bào)告基因的活性，但過表達(dá)KLF4極大地消除了miR-1誘導(dǎo)的內(nèi)皮炎癥。而且，miR-1抑制劑不僅能在體外減少內(nèi)皮細(xì)胞的炎癥，而且還能減弱ApoE缺陷小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化。
? 外泌體功能機(jī)制研究：
結(jié)果表明了脂肪肝細(xì)胞衍生的EVs通過miR-1遞送、KLF4抑制和NF-κB活化來促進(jìn)內(nèi)皮炎癥和動(dòng)脈粥樣硬化的形成。這些發(fā)現(xiàn)說明了肝細(xì)胞衍生的EVs在肝臟與血管系統(tǒng)之間遠(yuǎn)距離通訊中的重要作用，揭示了NAFLD與CVD之間聯(lián)系的新機(jī)制。
miRNA在肝細(xì)胞源性EVs中的表達(dá)譜
（Jiang F, et al. Journal of Hepatology, 2020.）
代表性客戶文章：
[1] Yu L, Sui B, Fan W, et al. Exosomes derived from osteogenic tumor activate osteoclast differentiation and concurrently inhibit osteogenesis by transferring COL1A1-targeting miRNA-92a-1-5p[J]. Journal of Extracellular Vesicles, 2021, 10(3): e12056.
[2] Jiang F, Chen Q, Wang W, et al. Hepatocyte-Derived extracellular vesicles promote endothelial inflammation and atherogenesis via microRNA-1[J]. Journal of Hepatology, 2020, 72(1): 156-166.
[3] Shang A, Gu C, Wang W, et al. Exosomal circPACRGL promotes progression of colorectal cancer via the miR-142-3p/miR-506-3p-TGF-β1 axis[J]. Molecular cancer, 2020, 19(1): 1-15.
[4] Huang W, Yan Y, Liu Y, et al. Exosomes with low miR-34c-3p expression promote invasion and migration of non-small cell lung cancer by upregulating integrin α2β1[J]. Signal Transduction and Targeted Therapy, 2020, 5(1): 1-13.
[5] Fang S B, Zhang H Y, Wang C, et al. Small extracellular vesicles derived from human mesenchymal stromal cells prevent group 2 innate lymphoid cell-dominant allergic airway inflammation through delivery of miR-146a-5p[J]. Journal of extracellular vesicles, 2020, 9(1): 1723260.
[6] Hou Z, Qin X, Hu Y, et al. Longterm exercise-derived exosomal miR-342-5p: a novel exerkine for cardioprotection[J]. Circulation research, 2019, 124(9): 1386-1400.
在線委托科研服務(wù)：
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外泌體lncRNA測序
| 測序內(nèi)容 | 推薦測序模式 | 建庫方式 |
| lncRNA (Exosomes) | HiSeq, PE150, 12G clean data | 銳博特有微量RNA建庫法 |
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技術(shù)特色：
? 專利外泌體抽提技術(shù)，配合特有微量RNA建庫方法，提供lncRNA測序整體服務(wù)
? 采用3 個(gè)外泌體或囊泡數(shù)據(jù)庫，注釋信息更完善，深入挖掘研究結(jié)果的佐證；
? 多種差異表達(dá)計(jì)算方法，可根據(jù)項(xiàng)目情況靈活選擇算法，展現(xiàn)更完美的數(shù)據(jù)；
? 全新的比對軟件，分析速度更快，結(jié)果更準(zhǔn)確；
? 提供腫瘤研究的臨床數(shù)據(jù)分析，使得分析結(jié)果更加飽滿。
應(yīng)用案例：
BMC immunology丨Identification of differentially expressed circulating exosomal lncRNAs in IgA nephropathy patients
盡管免疫球蛋白A腎病（IgAN）是最重要的原發(fā)性腎小球疾病之一，但I(xiàn)gAN的治療仍處于起步階段。IgAN診斷迫切需要非侵入性生物標(biāo)志物。本研究旨在探索IgAN患者血漿外泌體長鏈非編碼RNAs（lncRNAs）表達(dá)譜與其健康一級親屬之間的差異，這可能揭示新的非侵入性IgAN生物標(biāo)志物。首先，研究人員從IgAN患者及其一級親屬的血漿中分離出外泌體，然后提取6例IgAN患者及其相關(guān)親屬的外泌體總RNA，制備文庫并進(jìn)行RNA測序。
?? 外泌體lncRNA表達(dá)譜差異
測序結(jié)果顯示有70個(gè)差異表達(dá)的lncRNAs。與對照組相比，IgAN組有31個(gè)lncRNAs表達(dá)上調(diào)，39個(gè)lncRNAs表達(dá)下調(diào)。
?? 候選lncRNAs qRT-PCR驗(yàn)證
qRT-PCR檢測結(jié)果顯示lncRNA-G21551在IgAN患者中較健康親屬明顯下調(diào)。有趣的是，通過通路富集分析發(fā)現(xiàn)FCGR3B是lncRNA-G21551最近的蛋白編碼基因，其編碼免疫球蛋白G(IgG) Fc段低親和力受體。
本研究結(jié)果表明外泌體lncRNA-G21551在IgAN患者中表達(dá)顯著下調(diào)，具有作為IgAN非侵入性生物標(biāo)志物的潛力。
IgAN患者及其對照組的lncRNA差異表達(dá)譜
（Guo N, et al. BMC immunology, 2020.）
代表性客戶文章：
[1] Guo N, Zhou Q, Huang X, et al. Identification of differentially expressed circulating exosomal lncRNAs in IgA nephropathy patients[J]. BMC immunology, 2020, 21(1): 1-9.
[2] Xie L, Chen J, Ren X, et al. Alteration of circRNA and lncRNA expression profile in exosomes derived from periodontal ligament stem cells undergoing osteogenic differentiation[J]. Archives of Oral Biology, 2020, 121: 104984.
[3] Xu H, Chen Y, Dong X, et al. Serum exosomal long noncoding RNAs ENSG00000258332. 1 and LINC00635 for the diagnosis and prognosis of hepatocellular carcinoma[J]. Cancer Epidemiology and Prevention Biomarkers, 2018, 27(6): 710-716.
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